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基因編輯技術與動物模型構建研討會6月線上及上海線下培訓班
時間：2021-06-26 09:00 至 2021-06-27 18:00
地點：上海
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基因編輯技術與動物模型構建研討會6月線上及上海線下培訓班 已過期
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會議介紹
會議內容 主辦方介紹
基因編輯技術與動物模型構建研討會6月線上及上海線下培訓班宣傳圖
基因編輯技術與動物模型構建研討會
2021年6月26-27日 騰訊會議網絡會議室/上海中興和泰酒店
【網絡學習班背景】
CRISPR/Cas9 是細菌和古細菌在長期選擇壓力中形成的一種適應性免疫防御，可用來有效抵御病毒及外源DNA的入侵。CRISPR的Type II已經被廣泛用于基因工程，它包含Cas9，crRNA和tracrRNA，其中crRNA含有能夠識別20bp的靶向互補序列。Cas9，crRNA和tracrRNA組成復合體，識別并結合crRNA互補的序列，然后解開DNA雙鏈，Cas9中的HNH活性位點剪切crRNA的互補DNA鏈，RuvC活性位點剪切非互補鏈，最終導致DNA的雙鏈斷裂（DSB），進而實現基因的敲除和插入。
目前，CRISPR/Cas9系統已經廣泛用于對哺乳動物細胞，細菌，斑馬魚，小鼠，豬，猴的基因編輯。本學習班將詳細講解CRISPR/Cas9基因編輯工具原理，操作流程，理論結合實踐，將讓大家詳細了解到具體如何利用CRISPR/Cas9技術構建基因修飾動物等。學習班將為相關科研工作人員和興趣愛好者提供了很好的培訓資源。
【預期目標】
1、掌握基因打靶與基因編輯技術(ZNF,TALENs,CRISPR/Cas9)，能夠設計sgRNA靶點，構建CRISPR/Cas9質粒，用于基因敲除和敲入。
2、掌握CRISPR/Cas9質粒轉染方法, 陽性細胞克隆篩選方法體系，基因編輯細胞系的建立，基因修飾情況分析方法。
3、掌握CRISPR/Cas9脫靶產生的原因，脫靶檢測方法，降低脫靶問題的方法
4、掌握CRISPR/Cas9的實際應用，構建動物模型，對構建基因修飾小鼠和基因修飾大動物（豬）有較深入了解。
5、掌握新基因編輯工具，如：Cpf1, C2C2, base editing等。
6、掌握基因編輯研究領域前沿進展，基因編輯工具的拓展應用、臨床應用等，形成利用基因編輯工具結合自己研究內容等科學思維。
7、Base editor 使用方法。
8、基因編輯工具用于檢測新型冠狀病毒、基因編輯工具有可能應用于新冠治療等應用的介紹與拓展
查看更多
上海循掘生物科技中心于2020年2月21日舉辦TCGA&GEO生信高通量數據挖掘分析研討會2020（2月深圳班）會議。
會議日程
（最終日程以會議現場為準）
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基因編輯技術與動物模型構建研討會日程 |
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日期 |
時間 |
主題 |
詳細內容 |
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第一天上午 |
9:00-10:30 |
基因修飾技術簡介（一） |
基因打靶與基因編輯技術（ZNF, TALENs，CRISPR/Cas9）介紹 |
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基因編輯、基因修飾、基因打靶、轉基因、基因敲除、基因敲入等專業領域概念梳理 |
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CRISPR/Cas9結構和特點 |
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如何使用CRISPR/Cas9系統對特定基因進行敲除或定點插入（詳細方法步驟） |
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拓展如何提高定點敲入效率等知識 |
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10:30-10:45 |
休息 |
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10:45-12:00 |
基因修飾技術簡介（二） |
基因編輯工具Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14的結構、特點、工作原理 |
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如何使用Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14系統進行編輯 |
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Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14與Cas9的比較 |
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Cas9、Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14的應用和技術展望 |
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上午現場答疑 |
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12:00-13:30 |
午飯及午休 |
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第一天下午 |
13:30-14:00 |
CRISPR（sgRNA）設計方法和相關網站介紹 |
sgRNA設計方法和相關網站介紹 |
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CRISPR（sgRNA）的在線設計（在線互動設計演練） |
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14:00-15:30 |
基因編輯實驗詳細操作 |
gRNA oligos模板退火 |
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退火gRNA與線性化CRISPR/Cas9載體連接 |
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連接產物轉化到大腸桿菌（DH5α），轉化產物涂板培養，CRISPR/Cas9重組子細菌克隆挑取，擴大化培養，鑒定陽性克隆 |
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細胞轉染（Electroperation，Nuclefection，Nanofection，X-fection）等介紹與應用拓展 |
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單細胞克隆篩選（有限稀釋法，濾紙法、環法、流式分選法等）方法介紹與應用拓展 |
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15:30-15:45 |
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? |
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15:45-17:00 |
利用CRISPR/Cas9技術編輯動物細胞系 |
CRISPR/Cas9質粒細胞轉染方法 |
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陽性細胞克隆篩選，基因修飾基因組DNA模板快速制備 |
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目的靶基因的基因組DNA片段的PCR擴增，電泳檢測PCR產物 |
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PCR產物退火變性，T7E1酶切，電泳鑒定基因修飾情況 |
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17:00-17:30 |
CRISPR/Cas9關鍵點總結、歸納、拓展 |
基因編輯關鍵知識點歸納、總結和提煉 |
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CRISPR/Cas9技術應用拓展（如CAB基因敲入方法等介紹） |
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第二天上午 |
9:00-10:30 |
利用基因編輯技術構建基因敲除或敲入小鼠 |
基因工程小鼠的詳細分類與比較 |
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小鼠受精卵分離和培養 |
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CRISPR/Cas9系統顯微注射到小鼠受精卵 |
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受精卵顯微注射后回輸到代孕母鼠體內 |
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PCR和T7E1分析和鑒定基因敲除小鼠（Founder） |
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基因敲除小鼠基因敲除情況分析 |
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CRISPR/Cas9構建基因敲除小鼠詳細實驗流程歸納和總結 |
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10:30-10:45 |
休息 |
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10:45-11:15 |
利用基因編輯技術構建大動物模型 |
以大動物豬為例，進行詳細介紹基因編輯技術在大動物模型中的應用 |
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利用CRISPR/Cas9構建基因修飾大型動物（豬）流程 |
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基因修飾大型動物優勢 |
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利用CRISPR/Cas9構建基因修飾大動物（豬）模型介紹 |
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11:15-12:00 |
利用基因編輯技術構建動物模型的詳細案例介紹 |
利用CRISPR/Cas9構建基因修飾小鼠方法與相關基因修飾小鼠模型 |
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利用CRISPR/Cas9構建基因修飾大動物（豬、猴）方法與相關基因修飾大動物模型 |
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拓展基因編輯技術在其它物種中的應用 |
拓展基因編輯技術在其它物種中的應用 |
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? |
12:00-13:30 |
午飯及午休 |
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第二天下午 |
13:30-15:00 |
實驗結果的點評與討論 |
CRISPR/Cas9載體構建討論 |
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目的靶基因的基因組DNA片段的PCR擴增，電泳檢測PCR產物結果討論 |
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PCR產物T7E1酶切，電泳鑒定基因修飾情況結果討論 |
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Sanger測序鑒定基因編輯結果：CRISPR/Cas9質粒陽性轉化子測序結果確認；Sanger測序閱讀基因編輯情況；如何從測序色譜圖中閱讀靶向突變等位基因型 |
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15:00-15:30 |
CRISPR/Cas9脫靶問題分析 |
脫靶產生的原因 |
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脫靶檢測方法 |
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降低脫靶問題的方法 |
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15:30-15:45 |
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15:45-16:30 |
基因編輯領域進展大梳理與全面拓展 |
基因編輯技術的應用拓展介紹：SHERLOCK-V1、SHERLOCK-V2等應用于檢測方面的拓展，Base editing |
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結合當下新型冠狀病毒熱點，基因編輯工具用于檢測新型冠狀病毒、基因編輯工具有可能應用于新冠治療等應用的介紹與拓展 |
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Cas系列突變體的介紹與應用 |
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基因編輯的拓展應用（如應用于杜氏營養肌不良綜合征、白內障、消滅蚊子、植物中的應用、細菌中的應用等） |
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基因編輯工具的倫理問題于討論 |
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本次會議主辦方采用專業版ZOOM網絡會議軟件，參會需提前安裝好ZOOM會議軟件?？蔁o需注冊，直接參會。 |
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查看更多
會議嘉賓
（最終出席嘉賓以會議現場為準）
【講師背景】
李博士，副研究員。2014年博士畢業于德國慕尼黑工業大學大型動物生物技術研究所, 獲極優等榮譽學位（MAGNA CUM LAUDE）。主要研究領域為基因編輯動物模型構建與應用研究，成功構建過ROSA26基因定點敲入大動物模型、Kras基因點突變大動物模型、小鼠基因編輯肝癌模型等，在基因編輯研究領域積累了較好的研究知識背景，擅長對該領域知識講解和傳授，講解深入淺出、邏輯性強，并可針對性對基因編輯實際操作問題進行解答與啟發，以期更好地讓基因編輯工具應用于您的工作和學習研究中。目前已發表論文22篇，其中第一作者/并列通訊作者SCI論文12篇，以第一發明人申請國家發明專利2項。主持完成國家自然科學基金等項目6項，獲得上海市實驗動物學會2020年度學會工作先進個人、2019年 “ICLAS-CALAS國際青年獎”、2018年第三十屆上海市優秀發明選拔賽銀獎、2017年上海市人才發展資金等。
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參會指南
會議門票
【收費標準】
會務費用：線上：2800元/人
??????????線下：3200元/人
會議時間：2021年6月26-27日
會議地點：線上：騰訊會議網絡會議室
??????????線下：上海市浦東新區科苑路866號 中興和泰酒店
酒店協議價 豪華房500元/天，高級房400元/天，需通過主辦方預定
主辦方：上海循掘生物科技中心
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溫馨提示
酒店與住宿:
為防止極端情況下活動延期或取消，建議“異地客戶”與活動家客服確認參會信息后，再安排出行與住宿。
退款規則:
活動各項資源需提前采購，購票后不支持退款，可以換人參加。
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會議支持：
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會員折扣
該會議支持會員折扣
具體折扣標準請參見plus會員頁面 -
會員返積分
每消費1元累積1個會員積分。
僅PC站支持。 -
會員積分抵現
根據會員等級的不同，每抵用1元可使用的積分也不一樣，具體可參見PLUS會員頁面。 僅PC站支持。
會議地點
部分參會單位
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